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supererry
Nuovo Arrivato
Prov.: Torino
Città: Torino
82 Messaggi |
 Inserito il - 28 febbraio 2011 : 19:22:14
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ciao, volevo chiedervi un chiarimento. quando facciamo un'immuno, l'anticorpo lo mettiamo in un siero. facciamo ciò solo per facilitare l'ingresso dell'anticorpo o ci sono altri motivi? Serve a bloccare i siti aspecifici a cui l'anticorpo si legherebbe??
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domi84
Moderatore
Città: Glasgow
1724 Messaggi |
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
1582 Messaggi |
Inserito il - 28 febbraio 2011 : 22:41:17
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Come si prepara un anticorpo? che cosa è un siero? Si prende un antigene, poi anche un adiuvante( un qualcosa di tossico) e si fà una bella siringona ad un cucciolo, un pet, come un coniglietto bianco innocente. Si ripete il processo dopo 15 giorni. Si prende il cucciolo e si salassa, cioè si preleva tutto il sangue, lo si fà coagulare. La parte liquida (il siero) contiene tutta una serie di proteine fra cui l'anticorpo che viene utilizzato per fare gli "immuno".
In 2 parole l'anticorpo è il siero |
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supererry
Nuovo Arrivato
Prov.: Torino
Città: Torino
82 Messaggi |
Inserito il - 01 marzo 2011 : 23:18:46
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Scusate, ero di fretta e mi sono spiegato male.
NDS sta per Normal Donkey Serum
Volevo sapere a cosa serve il siero in cui diluiamo l'anticorpo, oltre che a facilitare l'ingresso di quest'ultimo nel tessuto.
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
1582 Messaggi |
Inserito il - 01 marzo 2011 : 23:24:45
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| ??? ma io i sieri li ho sempre diluiti in milk-tbs o in bsa-tbs che hai salassato una scimmia e usi il siero x fare le diluizioni? |
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Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 02 marzo 2011 : 01:29:58
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Secondo me ti stai riferendo al procedimento di blocking
che precede ogni incubazione per immunomarcature (western
blot, immunofluorescenze, immunoistochimiche, FACS staining).
Il motivo per cui si utilizza del siero di ratto o di un
qualsiasi altro animale (donkey, calf, anche human) è
perchè il siero è ricco di albumina o seralbumina e di
proteine con analoghe proprietà "saturanti".
E' lo stesso principio del milk per il western: serve a
saturare tutte le interazioni più deboli (fonti di "aspecifico"
per il tuo saggio) per poter rendere più stringente una
successiva instaurazioe di interazioni più forti (quello
che sarà il legame "specifico" del tuo anticorpo).
Nella maggior parte dei casi il siero può venire surrogato
da seralbumina (e.g. la famosa BSA) o da altri reagenti bloccanti. |
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
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supererry
Nuovo Arrivato
Prov.: Torino
Città: Torino
82 Messaggi |
 Inserito il - 03 marzo 2011 : 18:59:01
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Grazie mille Dionysos, scusate se non sono stato chiaro
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NDS
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