isolamento dei granulociti

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max power
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4 Messaggi

Inserito il - 15 marzo 2011 : 22:12:24

Salve a tutti... Vorrei esporre un mio problema e sapere se qcuno ha una soluzione.
Sto cercando di isolare i vari tipi di cellule bianche da sangue umano; centrifugo questo su 2 tipi di ficoll uno a d 1.077 che mi separa i PBMC e l'altro a d 1.114 per separare i granulociti. prelevo l'anello granulocitico ed essendo ricco di eritrociti, effettuo uno shock osmotico con dH2O per 6-8 secondi, quindi lavo un paio di volte con PBS, pelletto e congelo a -80�. Quindi liso e sottopongo per i miei esperimenti ad elettroforesi bidimensionale. Le proteine mi vengono sempre immancabilmente degradate e non riesco a capire il perch�.

mariel
Nuovo Arrivato

1 Messaggi

Inserito il - 13 ottobre 2012 : 11:35:59

Ciao, sono Mariel
spero che ci sia qualcuno che possa indicarmi un protocollo per l'isolamento di granulociti da sangue intero.
Grazie