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 Clonazione direzionale con primer modificati
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Miciaglo
Nuovo Arrivato

Prov.: TV


40 Messaggi

Inserito il - 25 marzo 2011 : 13:28:54  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Miciaglo Invia a Miciaglo un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Le mie dispense propongono questo argomento e sinceramente non riesco a capire la figura nell'ultimo passaggio dove si torna in doppia elica ma "allungata"

immagine:


all'inizio si denatura il DNA così da separare i filamenti, si appaiano primer con sequenze di taglio per due diversi enzimi, ognuno verso l'estremità 5'.
Ma poi? o.o

grazie :)

GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8408 Messaggi

Inserito il - 29 marzo 2011 : 00:43:00  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Sai che non riesco a capire quale sia il tuo dubbio...

E' una PCR normale, con dei primers che si attaccano alla sequenza e che hanno delle codine (quelle con i siti di restrizione) che non si appaiano, ma una volta che avviene la PCR la polimerasi farà la sequenza complementare anche alle codine e quindi alla fine avrai il prodotto di PCR con il tuo gene e ai lati le sequenze di restrizione.
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