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Autore Discussione  

Biotecgen
Utente Junior

Città: Napoli


191 Messaggi
Inserito il - 13 aprile 2011 : 23:36:23  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Biotecgen Invia a Biotecgen un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
aiutatemi a capire questo passaggio che a me non è per nulla chiaro,
nel kit dell'elecsys c'è questo passaggio che dice:

1°passaggio: dopo aggiunta di HBcAg si forma un complesso con gli anticorpi anti-HBc nel campione.

2°passaggio: dopo l'aggiunta di anticorpi biotilinati e marcati con un complesso di rutenio specifici anti-HBcAg nonchè di particelle rivestite di streptavidina, vengono occupati i siti di legame ancora liberi degli antigeni dell'HBc, ed il complesso totale si lega alla fase solida mediante l'interazione biotina-streptavidina.

il 1° non c'è nulla da capire quindi oK. Nel secondo invece perchè si usano anticorpi biotilinati? che funzione ha il rutenio ? la streptavidina ? ho un pò di confusione
non esistono domande indiscrete...le risposte a volte lo sono.

Martin.diagnostica
Utente Attivo

H. pylori



1582 Messaggi
Inserito il - 14 aprile 2011 : 01:02:52  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Martin.diagnostica Invia a Martin.diagnostica un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da Biotecgen

aiutatemi a capire questo passaggio che a me non è per nulla chiaro,
nel kit dell'elecsys c'è questo passaggio che dice:
il 1° non c'è nulla da capire quindi oK. Nel secondo invece perchè si usano anticorpi biotilinati? che funzione ha il rutenio ? la streptavidina ? ho un pò di confusione

1° indizio: la streptaavidina lega con avidita la biotina
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Biotecgen
Utente Junior

Città: Napoli


191 Messaggi
Inserito il - 14 aprile 2011 : 21:04:10  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Biotecgen Invia a Biotecgen un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
oK allora vediamo un pò, l'idea che mi sono fatto è questa: praticamente gli anticorpi anti-HBV presenti nel siero del soggetto affetto formano immunocmplessi con l'antigene che abbiamo introdotto quindi l'HBcAg. A questo punto vengono utilizzati altri anticorpi che oltre al complesso di rutenio (che immagino sia implicato nel fenomeno della chemiluminescenza) legano anche la biotina, questi anticorpi dovrebbero essere specifici per l'antigene stesso che abbiamo introdotto, cioè HBcAg. Se come dici tu la biotina lega le particelle con streptavidina a questo punto dovrebbe formarsi un mega-complesso costituito da

ANTICORPI ANTI-HBsAg ---- HBsAg ----- ANTICORPI(leganti biotina e rutenio)Anti-HBsAg ---- particelle rivestite di streptavidina....
non esistono domande indiscrete...le risposte a volte lo sono.
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