-ragazzi per caso sapreste darmi un aiuto sul clonaggio funzionale e posizionale????non riesco a capire come si fanno e concettualmente che fanno!!!!Vi prego aiutatemi, giovedì ho l'esame di genetica ed ingegneria genetica.. Grazie in anticipo
Allora, clonaggio funzionale e posizionale sono termini equivalenti a genetica inversa e diretta.
In pratica nel clonaggio funzionale tu vedi che ad es. un individuo ha un certo fenotipo diverso dal wild type. Vai allora a cercare quale proteina non sia funzionale (ovviamente restringi la ricerca a proteine che possano generare quel fenotipo) e da quella risali al gene. Insomma parti dalla funzione e risali al gene.
Nel clonaggio posizionale, invece, parti dalla posizione e risali al gene. In questo caso non ti interessa sapere che c'è un certo path biochimico non funzionale, cioè non ti interessa la funzione, vai a vedere direttamente il DNA. Quindi, parti dall'individuo con una malattia ereditaria e fai analisi di linkage per trovare dei marker genomici di questa malattia. Da lì puoi poi risalire al gene mutato. Dai anche un occhio a questo link (è la versione online dello Strachan, il cap. 15 parla di questo): http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/bv.fcgi?rid=hmg.chapter.1867