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monticone.silvia
Nuovo Arrivato
3 Messaggi |
 Inserito il - 27 maggio 2011 : 02:57:01
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Ciao tutti,non ho mai scritto nel forum, ma vi seguo da parecchio tempo e utilizzo il sito per risolvere i miei numerosissimi problemi!!!
Scusate la banalità della domanda...ma è possibile che se io, per errore in una PCR anzichè un forward primer e un reverse ho messo due distinti reverse per la sequenza in questione si amplifichi comunque qualcosa???
Grazie in anticipo ragazzi e complimenti per il forum, utilissimo davvero!!!
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monticone.silvia
Nuovo Arrivato
3 Messaggi |
Inserito il - 27 maggio 2011 : 03:17:49
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Mi spiego meglio...ho due set di primers, uno più esterno e uno più interno. Temo di aver utilizzato i due reverse....ma sul gel di agarosio si vedeva cmq una bella banda. Possibile??
Grazie in anticipo a chi avrà voglia di ripondere |
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thejoint84
Nuovo Arrivato
46 Messaggi |
Inserito il - 27 maggio 2011 : 15:10:06
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Secondo me é aspecifico.... perché se avessi messo un fwd ed un reverse non dello stesso set, qualcosa comunque ti usciva... di grandezza diversa, ma un amplificato specifico... in questo caso é impossibile avere un prodotto specifico.....
Secondo me uno dei due reverse si é legato ad un´altra sequenza ed ha fatto da forward!!!
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http://cornermolecularbiology.blogspot.com/
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Morfeo
Nuovo Arrivato
Città: Roma
110 Messaggi |
Inserito il - 28 maggio 2011 : 12:41:05
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| Prova a disegnarti su un templato qualsiasi un reverse a monte e uno a valle per capire meglio. Comunque estenderà un pò ma non amplifichi nulla! |
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Discussione |
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PCR con 2 primers reverse
Didattica e Relazioni
