bene ho capito il tipo di esperimento che hai eseguito. l'eccesso di substrato ti garantisce che tutti i siti attivi dell'enzima vengono saturati e che la tua reazione segua una cinetica di ordine zero.
E
S ----> P #Segui la comparsa di B leggendo Ass a 400nm
Finchè [S] >>[E] l'aumento di ASS (<=> comparsa di P) è lineare cioè deltaA/min=cost
mano mano che la reazione procede S diminuisce e la velocità di reazione diminuisce
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| * # T0>T>T1 deltaA=cost. (lineare)
| *| # T>T1 deltaA diminuisce (non lineare)
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t0 t1
Il tuo spettrofotometro considera solo i primi 5 minuti per calcolare deltaA e quindi le unità enzimatiche
Non so perchè fa cosi potrebbe avere semplicemente in memoria un impostazione di qualche altro esperimento oppure effettuare automaticamente una valutazione dell'andamento della cinetica e selezionare l'intervallo di tempo che giudica lineare
Tu come calcoli il deltaA/min se hai una tabella ti conviene fare la retta dei minimi quadrati. Per verificare la linearità della cinetica il coefficiente R. Se il valore di R è basso escludi i tempi più alti.
grafico attività enzimatica allo spettrofotometro
Didattica e Relazioni
Inserito il - 05 giugno 2011 : 11:52:07
grafico attività enzimatica.pdf
