ciao a tutti. sto facendo delle PCR su DNA estratto da siero. mi succede una cosa strana: faccio la PCR e nella corsa non si vede nulla...allora faccio la nested della PCR e quando corro ho il pozzetto intasato di DNA!!! e ovviam nn c'è la mia banda...
secondo voi cm' è possibile?
ho già provato a diluire il campione madre per poi fare la PCR, ho provato a diluire la PCR prima di fare la nested...insomma...tutte le diluizioni possibili le ho praticamente porvate! nel caso specifico questo ultimo esperimento l ho fatto pendendo 1ul dalla madre per la PCR, poi nn vedendo nulla ho fatto una diluizione 1:10 e 1:100 e ho fatto le nested...e i pozzetti ora sono pieni! miracolo? trasmutazione??? mah.... illuminatemi!