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Autore

Discussione

lisa
Nuovo Arrivato

Citt�: napoli

18 Messaggi

Inserito il - 03 luglio 2004 : 10:33:26

C'� qlkno che sa spiagarmi bene le tecniche: ASO,AMPFLPS,Solid Phase Minisequencing e Deletion Analysis??
Grazie mille

Rando
Nuovo Arrivato

Prov.: Lodi

17 Messaggi

Inserito il - 03 luglio 2004 : 18:45:49

Per la ASO (Ibridazione con oligonucleotide allele-specifico) puoi guardare su www.medicalsystems.it/editor/jcla/jcla_1997_3/lutz.html
� pure in italiano! e spiega anche alcune varianti come la ASO inversa.

Minisequencing (non garantico) --> www.ich.ucl.ac.uk/cmgs/miniseq.htm

ciao
Rando

lisa
Nuovo Arrivato

Citt�: napoli

18 Messaggi

Inserito il - 04 luglio 2004 : 08:52:16

Grazie Rando!!

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 05 luglio 2004 : 10:51:22

Per le altre tecniche non ti so dire... ma il minisequencing � una delle tante applicazioni dei chip.
In pratica supponi di avere una sequenza di 100bp e sapere che la 30a base � una G, ma esiste una mutazione in cui � una A.
Tu fissi su di un chip la sequenza da 1 a 29 e fai ibridare il DNA del tuo campione con questa sequenza: in questo modo tutto il DNA di interesse, mutato o no, si legher� al chip.
Ora metti a incubare il tutto con citosina e timina marcate con 2 fluorofori diversi (es. la C con un fluoroforo rosso e la T con uno verde). Se il DNA del tuo campione � wt vedrai fluorescenza rossa, se � mutato omozigote vedrai verde, se invece � eterozigote vedrai giallo (o cmq la somma dei due colori).
Ovviamente la marcatura si pu� fare anche in modi diversi.

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