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Discussione

besa
Nuovo Arrivato

1 Messaggi

Inserito il - 11 luglio 2011 : 11:51:08

salve ragazzi mi sapreste elencare alcuni motivi per i quali un PCR pu� fallire considerando di aver messo nella mia provetta titti i componenti?

biocandy
Utente Junior

370 Messaggi

Inserito il - 11 luglio 2011 : 12:06:17

I motivi potrebbero essere tanti: il DNA � degradato, il primer non si lega, il termociclatore non lavora bene (errori nel setting delle temperature)...cmq puoi dare un'occhiata qui

http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=22455&SearchTerms=pcr,non,funziona

Luss1908
Nuovo Arrivato

49 Messaggi

Inserito il - 11 luglio 2011 : 12:13:57

Potrebbe essere per la presenza di inibitori nel campione o a causa di una contaminazione da nucleasi. Oppure la causa potrebbe essere un eccesso di acido nucleico, la competizione di sequenze simili al DNA target per l'annealing con i primers o variazioni nella sequenza nucleotidica del target...O ancora una temperatura di annealing troppo elevata o concentrazioni di Mg2+ troppo basse....

maedea
Nuovo Arrivato

24 Messaggi

Inserito il - 19 luglio 2011 : 10:40:15

Potrebbe anche essere che la quantit� di DNA � troppo bassa? Io sto avendo lo stesso problema con le mie RT-PCR. In genere, quanti nanogrammi di cDNA andrebbero utilizzati?