Ciao a TUTTI!Mi servirebbe un aiuto per gli enzimi di restrizione: Abbiamo due enzimi di restrizione Bam HI Hind III che tagliano 8200 5250 500 3450 la doppi digestione BamHI/HindIII produce il seguente pattern elettroforetico: Bam/Hind 5250 2950 500 VI PREGO AIUTATEMI A CAPIRNE IL MOTIVO...HO L'ESAME TRA POCO..:))
Il DNA da tagliare è lungo8700 bp (8200 + 500 -- 5250 + 3450) Una taglio di Hind III è allìinterno del frammento più lungo generato da BamHi
---------------------------- frammento intero ----------------------- ---- Taglio di Bam HI
---------------- ------------- Taglio di HIND III
---------------- -------- ---- digestione comune
Chiaro?
Buono studio
Ti ringrazio tanto, ho capito alcune cose ma come mai i risultati della doppia digestione Bam/Hìnd sono: 5250 2950 500 con quale ragionamento si arriva a questi risultati?Baci
1) BamHI ti dà 2 frammenti, vuol dire che c'è un solo sito di taglio per questo enzima (vedi figura di sopra)
2) Anche Hind ti dà 2 frammenti, quindi anche x questo enzima c'è un solo sito di taglio
3) Nella doppia digestione hai 3 frammenti in quanto avrai 2 siti (Bam e Hind)
Il problema è sapere chi vien prima e chi vien dopo.
Hai essenzialmente 2 possibilità (puoi anche mettere B dopo H, ma viene la stessa cosa).
H
5250 | 3450
--------------------------
500 | 8200
B
H
3450 | 5250
--------------------------
500 | 8200
B
Nel caso 1 la doppia digestione ti darà un pezzo da 500, un pezzo da 5250-500=4750 e un pezzo da 3450 Nel caso 2 la doppia digestione ti darà 500, 3450-500=2950 e 5250
Ciao!Ho provato a fare alcuni esercizi su questi enzimi e alcuni mi sono venuti ma come si fa a sapere le combinazioni giuste quando non si conosce il risultato? :) baci help!
Ad esempio dall'esercizio precedente i due enzimi: Bam Hind 8200 5250 500 3450 Io so che il risultato della loro doppia digestione è: Bam/hind 5250 2950 500 se non lo sapessi come farei a trovare le combinazioni giuste come illustrato in precedenza?grazie bacioni