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moi80
Nuovo Arrivato
1 Messaggi |
 Inserito il - 25 luglio 2011 : 14:13:36
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Ciao a tutti, sono nuova, complimenti per il sito.
Ho un problema con la reazione di rt-pcr one step spero che qualcuno di voi riesca a darmi qualche consiglio. Parto da rna virale estratto da siero con colonnine, devo retrotrascrivere e amplificare un frammento di circa 220 bp, visualizzando il prodotto su gel di agarosio in prima battuta vedevo la mia banda alla giusta altezza preceduta da un lungo smear e al di sotto dimeri di primer questo utilizzando tutti i parametri consigliati dal datasheet della polimerasi che utilizzo. I dimeri di primer modificando la t di melting sono spariti ma rimane lo smear sopra la mia banda, a qualcuno è successo, dove devo agire per cercare di ottenere un prodotto pulito?
Chiedete tutte le info che possono servire per capire meglio il problema.
Grazie a tutti
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rt-pcr one step
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