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Lucas
Nuovo Arrivato



5 Messaggi

Inserito il - 12 novembre 2006 : 22:46:38  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Lucas Invia a Lucas un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti...sono nuovo di questo forum...sembra davvero interessante...
C'è un quesito a cui ancora non mi sono dato una risposta, riguardo il TAE: perchè utilizzare un tampone forte come il TRIS acetato per la separazione del DNA? Qual'è la sua funzione? perchè non utilizzare un tampone meno forte, tipo un tampone salino?

A presto, Lucas.

chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 13 novembre 2006 : 00:35:28  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao Lucas e benvenuto sul forum!

Nulla vieta di usare un altro tampone, di solito si usa il Tris principalmente per due motivi:

1) quello ovvio di tenere costante il pH. L'estrazione di acidi nucleici (soprattutto RNA) può essere abbastanza rognosa... meglio avere un tampone forte che ti tenga fisso il pH. Inoltre sali inorganici possono facilmente interferire con successive manipolazioni che fai sul DNA/RNA (es. PCR).

2) il Tris aiuta a permeabilizzare la membrana, interagendo con i fosfolipidi e quindi migliora la resa di estrazione

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Lucas
Nuovo Arrivato



5 Messaggi

Inserito il - 14 novembre 2006 : 09:30:38  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Lucas Invia a Lucas un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
grazie chick80...ma vorrei sapere di più se possibile...come agisce per esempio...grazie
Lucas
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Anyra
Utente Junior

Anyra

Prov.: Pesaro-Urbino
Città: Saltara


212 Messaggi

Inserito il - 15 novembre 2006 : 12:42:35  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Anyra Invia a Anyra un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Il tris è il tampone utilizzato in tutte le elettroforesi (o quasi) comprese quelle di proteine.
Perchè poi non si dovrebbe utilizzare un tampone forte come il tris?
Nell'elettroforesi il pH rappresenta una variabile molto importante in grado di modificare completamente il pattern delle bande anche per variazioni minime.
Per una riproducibilità di tecnica è necessario che anche le più piccole interferenze sul pH vengano annullate.
Ciao

Il mio Cavaliere
http://s4.battleknight.it/index.php?loc=hire&ref=OTA3NTAw
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