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Discussione |
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
1582 Messaggi |
 Inserito il - 09 settembre 2011 : 23:42:27
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Perchè non pubblichiamo qualche bella foto dei nostri laboratori, dove siamo soliti spendere gran parte delle nostre giornate :D
la biochimica
depurazione etidio
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Giuliano652
Moderatore
Prov.: Brescia
6941 Messaggi |
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
1582 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 02:11:55
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| non riscuote successo proviamo con un up |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 11:19:02
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ma nutro la speranza che anche quest'anno si organizzi la raccolta immagini per il calendario 2013, quindi queste immagini potrebbero andare in concorso con tutte le altre...o mi state dicendo che quest'anno niente calendario?!?  |
...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 15:31:43
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Citazione:
Messaggio inserito da Iside
ma nutro la speranza che anche quest'anno si organizzi la raccolta immagini per il calendario 2013
il corso di yoga a cui mi sono iscritta mi farà bene, mi darà la pace interiore e la consapevolezza che siamo ancora nel 2011...ooooooohmmmmmmmm....
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...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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SpemannOrganizer
Utente
Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 17:27:32
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SpemannOrganizer
Utente
Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 17:33:04
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Ho provato a ridimensionare le immagini ma nn ci son riusciti :/ |
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Geeko
Utente
Città: Milano
1043 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 18:23:35
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 Bellissimo lo Xenopus albino!!!! Il tuo lab varrebbe una visita solo per vedere lui!!
Ma è ancora in vita? Non è che è un campione in formalina?! Hehehe |
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SpemannOrganizer
Utente
Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 19:32:25
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| Sì sì è vivo e vegeto :)! in realtà non è albino ma solo chiaro (è possibile che sia un incrocio w.t. x albino, sinceramente non so)... quelli albini sono molto + chiari, proprio bianchi :) |
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
1582 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 19:36:46
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| come si chiama l'animale ? |
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SpemannOrganizer
Utente
Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 19:54:26
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| si chiama martin :) no scherzo è uno Xenopus laevis |
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SpemannOrganizer
Utente
Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 19:58:54
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| un grazie a Chick80 per avermi ridimensionato la prima immagine io sono un po' imbranato con ste cose :P |
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AleXo
Moderatore
Prov.: Estero
Città: San Francisco, California
1550 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 20:51:00
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un momento démodé e technicolor del mio dottorato (H&E, IHC)
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AleXo
Moderatore
Prov.: Estero
Città: San Francisco, California
1550 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 21:05:50
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a seguire, foto post esperimento che ben rappresenta la politica del mio vecchio lab "when in doubt, pour it down!"
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
1582 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 21:14:35
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Citazione:
Messaggio inserito da SpemannOrganizer
si chiama martin :) no scherzo è uno Xenopus laevis
si ma non ha un nome non so rospo, pallidinio ? |
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SpemannOrganizer
Utente
Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 22:05:03
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Citazione:
Messaggio inserito da Martin.diagnostica
Citazione:
Messaggio inserito da SpemannOrganizer
si chiama martin :) no scherzo è uno Xenopus laevis
si ma non ha un nome non so rospo, pallidinio ?
No, tra l'altro quello non è il mio. Io ho diversi transgenici ma a nessuno ho dato un nome. Pero', ora che mi ci fai pensare, ho un transgenico parecchio prezioso perchè ha il nervo ottico labelled con la GFP e con la RFP, ed è carino perchè se ne puo' seguire tutto il tratto fino al tetto ottico, ma è prezioso soprattutto perchè è il solo che mi è venuto finora!!! Lo chiamerò Highlander! o MacLeod? che dici?  |
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
1582 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 22:10:35
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Citazione:
Messaggio inserito da SpemannOrganizer
No, tra l'altro quello non è il mio. Io ho diversi transgenici ma a nessuno ho dato un nome. Pero', ora che mi ci fai pensare, ho un transgenico parecchio prezioso perchè ha il nervo ottico labelled con la GFP e con la RFP, ed è carino perchè se ne puo' seguire tutto il tratto fino al tetto ottico, ma è prezioso soprattutto perchè è il solo che mi è venuto finora!!! Lo chiamerò Highlander! o MacLeod? che dici?
io propongo froglander! magari ci fai vedere ci posti una foto
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SpemannOrganizer
Utente
Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2011 : 22:53:09
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| froglander? non male!! :) |
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SpemannOrganizer
Utente
Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 14 settembre 2011 : 13:42:13
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ed ecco a voi: Froglander :)
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Genaux1989
Utente
715 Messaggi |
Inserito il - 14 settembre 2011 : 14:58:07
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Ma cosa sarebbe? Una specie di rospo trasparente colorato tramite GFP se non ho capito male, giusto?
Toglietemi una curiosità: come si fa a fare una cosa così, nella pratica? Cioè, come fate a evidenziare e trattare le varie sequenze di DNA in modo da ricombinarle con quelle del genoma ospite? Esistono dei macchinari appositi che lo fanno o dovete farlo voi manualmente? Se lo fate manualmente COME lo fate?
Io queste cose le conosco solo in teoria, non abbiamo mai fatto pratica in laboratorio con la biologia molecolare. |
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SpemannOrganizer
Utente
Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 14 settembre 2011 : 15:10:25
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è una rana si', ma allo stadio larvale ancora (cioè girino). Nella fattispecie il girino era allo stadio 46 quando fotografato, quindi lontano dalla metamorfosi. Ora è cresciuto un po' ma sempre girino. In realtà non è che l'ho proprio colorato, ma ho inserito un "pezzetto" di DNA codificante per la GFP e per una particolare RFP. Queste due sequenze sono sotto un unico promotore, specifico per le retinal ganglion cell, cioè quelle cellule che formano il nervo ottico. Difatti nella foto è ben visibile il nervo ottico che parte dall'occhio e arriva fino al tetto ottico del cervello (quel cerchiolino che vedi dorsalmente è appunto il termine degli assoni che hanno raggiunto il tetto ottico).siccome il girino era adagiato su un lato, l'altro nervo ottico si vede a malapena.
Come lo facciamo? Nella prima foto che ho postato, si vede un microscopio (in realtà uno stereomicroscopio o microscopio da dissezione) con ai lati due strumenti: l'iniettore a destra e il regolatore a sinistra, che altro non è che una pompa idraulica che spinge volumi piccolissimi di liquido nel tubicino dell'iniettore. A questo è collegato un ago, che io riempio con il mio costrutto di DNA linearizzato (in realtà sperma di Xenopus con DNA integrato). Quindi inietto tale mix nelle uova non fertilizzate di Xenopus, e alla fine se sei fortunato ottieni qualche animaletto transgenico :) |
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Genaux1989
Utente
715 Messaggi |
Inserito il - 14 settembre 2011 : 15:16:48
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Credo di aver capito, a grandi linee, il procedimento, ma c'è una cosa che mi resta ignota, e in particolare: come fai ad ottenere
Citazione:
Messaggio inserito da SpemannOrganizer
il mio costrutto di DNA linearizzato
?
Voglio dire, si tratta di un frammento di DNA già disponibile in commercio, oppure sei stato tu stesso a comporlo?
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SpemannOrganizer
Utente
Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 14 settembre 2011 : 15:29:14
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no, è il prodotto del sudore della mia fronte :), una bestiola di circa 7000 bp (escludendo il backbone).
Ho chiesto a un lab il promotore, a un altro la RFP, la GFP ce l'avevamo già, e poi ho assemblato il tutto.
Ho appreso comunque che ci sono ditte che ti clonano loro la roba che vuoi, tu basta che indichi cosa vuoi e in che ordine, fornisci loro la sequenza, li paghi, e ti trovi il plasmide con costrutto bell'e pronto. |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
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Discussione |
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Vita di lab:i migliori scatti
