Ciao, quando l'ho dovuto fare io(non ero abbandonata a me stessa,ma ero seguita da persone che lo sapevano fare)ho scaricato tutta la sequenza, ho individuato il mio gene a quel punto ho considerato 19pb a monte e a valle del gene. la sequenza a monte è il tuo primere sense e la seq.a valle è il tuo primer antisense. una volta identificata la seq.nucleotidica abbiamo mandato il tutto a un' azienda che li ha sintetizzati e in una settimana ce li ha mandati. ciò puoi farlo se sai la sequenza!
Beh non basta prendere 19bp a caso da una parte e dall'altra, ci sono varie regole per disegnare dei buoni primers. Comunque elenaimo, se provi a cercare un po' nelle discussioni è stato spiegato parecchie volte, e ci sono anche esempi pratici su alcune sequenze.