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zerhos
Utente Junior
Prov.: Pisa
Città: Pisa
421 Messaggi |
 Inserito il - 18 novembre 2011 : 01:04:42
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Uno dei metodi per aumentare la quantità di dna stampo è fare un whole genome amplification, ad esempio prima dell'amplificazione dovresti metter su una Inter-ALU-PCR o un amplificazione con la phi29.
se invece desideri lavorare sullo stesso frammento amplificato ti conviene semplicemente fare una Nested-PCR.
Fai una prima reazione di PCR per ottenere un po del tuo templato, ma non far arrivare la reazione a plateau, quindi massimo setta 18-20 cicli. A questo punto metti su un'altra reazione di PCR, usando come stampo l'amplificato della PCR precedente. Per evitare di portarti dietro schifezze, dovresti utilizzare dei primers più interni rispetto a quelli usati nella prima reazione, in maniera tale che amplificherai soltanto l'amplicone desiderato. |
"l'unica differenza tra me e un pazzo è che io non sono pazzo!"
Salvador.Dalì
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