Buona sera a tutti il mio dubbio è il seguente: l'efficenza dello shock termico, per trasformare le cellule batteriche con plasmidi, risente della grandezza del plasmide con cui si vuol trasformare? Secondo voi per plasmidi veramente grandi (12-15kb)aumentare il tempo di shock può aiutare o uccido tutte le mie cellule? Qualcuno di voi ha esperienza in questa cosa, sinceramente non riesco a trovare niente di utile che corrobori la mia ipotesi ne che la neghi. grazie
"l'unica differenza tra me e un pazzo è che io non sono pazzo!" Salvador.Dalì
Ciao Zerhos! So che non è molto educato rispondere ad una domanda con un'altra domanda, ma mi serve per capire. I tuoi dubbi derivano dal fatto che hai già provato con il tempo di heat shock che normalemnte utilizzi e non hai ottenuto buoni risultati? Che cellule usi?
No, non ho ancora provato, era soltanto un dubbio che mi è venuto, cercavo solamente conferma, oggi proverò a variare il tempo di shock termico, il mio plasmide è di circa 14kb e uso le DH5-alpha. Vi farò sapere ;)
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