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Aurora89
Nuovo Arrivato
Città: lecce
15 Messaggi |
 Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:04:58
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salve a tutti avrei bisogno di urgente aiuto.. non riesco a risolvere questo esercizio :concentrazione iniziale enzima 10 U/microlitro , devo ottenere il volume da prelevare se voglio ottenere una concentrazione finale 4 U/CAMPIONE con volume finale 25 microlitri.
spero di essermi ben spiegata,il prof ha detto che devo dividere tutto per 25, e poi applicare la solita formula delle diluzioni, ma nonostante non trovo il risultato..
grazie
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0barra1
Utente Senior
Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:09:29
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Incomincia consultando la pagina Principi, su MoLab: http://www.molecularlab.it/principi/
Quindi prova a postare una soluzione ed infine noi ti aiuteremo a risolvere i punti non chiari 
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So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss
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Aurora89
Nuovo Arrivato
Città: lecce
15 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:14:28
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| ho letto da principi ma non riesco a trovare nulla che mi dica dell'unità enzimatiche (sarà l'ansia pre-esame che mi sta annebbiando la mentee)..però ho pensato che se nella prima ne ho 10 x un microlitro se questa fosse 25 microlitri che ne sarebbero 250. posso allora a questo punto ragionare come una diluizione normale? |
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0barra1
Utente Senior
Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:19:56
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| Concordo sul 250, ma ti consiglio di non pensare troppo alle U, trattale come fossero microgrammi e vai sciolta. Il fatto che si parli di unità enzimatiche non rende la diluizione "speciale". |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:24:12
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Che siano unità enzimatiche, ml, kg o g non importa, le diluizioni sempre quelle sono.
Citazione:
però ho pensato che se nella prima ne ho 10 x un microlitro se questa fosse 25 microlitri che ne sarebbero 250.
No! 25 ul è il volume del tuo campione finale, non della tua soluzione.
Il ragionamento è molto semplice: hai 10 U/ul vuol dire che in un ul hai 10U, in 0.5ul hai 5U, in 0.1ul hai 1U e così via.
Vuoi 4 U/campione, vuol dire che devi prendere 0.4ul (=4/10) di soluzione iniziale, quale che sia il volume finale del campione.
EDIT: se il tuo prof ti ha detto di dividere per 25 non è che la soluzione finale sia 4U/ul (e non 4ul/campione)? |
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0barra1
Utente Senior
Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:33:42
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Citazione:
Messaggio inserito da chick80
Citazione:
però ho pensato che se nella prima ne ho 10 x un microlitro se questa fosse 25 microlitri che ne sarebbero 250.
No! 25 ul è il volume del tuo campione finale, non della tua soluzione.
Aspetta! Io ho inteso la frase cosi': se ho una concentrazione di 10 U/uL e 25 uL, allora ho in totale 250 U. Che poi non serva a granché come ragionamento, su cio' son d'accordo. |
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Aurora89
Nuovo Arrivato
Città: lecce
15 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:34:23
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| ragionando : se per averne 4 ne prendo 0,4 , per averne 4 su 25 mi basterà fare 4/25..esatto? |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:35:20
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Citazione:
Aspetta! Io ho inteso la frase cosi': se ho una concentrazione di 10 U/uL e 25 uL, allora ho in totale 250 U.
Ah, io avevo capito che 25ul era il volume dei campioni, non dello stock... a questo punto Aurora dovrebbe chiarificarci la cosa |
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Aurora89
Nuovo Arrivato
Città: lecce
15 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:37:04
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| 25 ul è il volume finale..mi sa che ho sbagliato io in partenza.. |
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0barra1
Utente Senior
Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:38:36
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Citazione:
Messaggio inserito da Aurora89
ragionando : se per averne 4 ne prendo 0,4 , per averne 4 su 25 mi basterà fare 4/25..esatto?
Tu non usi le unità di misura e non vabbene (cit.).
Se tu hai una soluzione a concentrazione 10 U/uL e vuoi passare a 4 U/uL, che diluizione devi fare? Che calcolo fai? |
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0barra1
Utente Senior
Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:39:52
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Citazione:
Messaggio inserito da chick80
Citazione:
Aspetta! Io ho inteso la frase cosi': se ho una concentrazione di 10 U/uL e 25 uL, allora ho in totale 250 U.
Ah, io avevo capito che 25ul era il volume dei campioni, non dello stock... a questo punto Aurora dovrebbe chiarificarci la cosa
No, tu hai capito bene. Io avevo dato la mia approvazione sul fatto che in 25 uL a 10 U/uL si hanno 250 U. Il tutto pero' è abbastanza slegato dall'esercizio. |
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Aurora89
Nuovo Arrivato
Città: lecce
15 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:40:52
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| mi calcolo il fattore di diluizione ovvero faccio 10/4..scusatemi x le mancate unità di misura :( |
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0barra1
Utente Senior
Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:44:49
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Figurati, è che abituandosi a non scriverle poi si finisce per non farlo anche durante gli esami. Comunque se le scrivi sul forum, agevoli la nostra comprensione.
Si, il calcolo è giusto. Ora sai che devi diluire 2,5 volte il tuo "stock", con il volume finale in cui diluisci pari 25uL. |
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Aurora89
Nuovo Arrivato
Città: lecce
15 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:48:28
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| ok e quindi seguendo quello che viene detto in principi ora devo quindi dividere il volume finale per il il mio fattore di diluizione..giusto? |
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0barra1
Utente Senior
Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:52:49
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| Si ;) Se vuoi posta il risultato e poi controlliamo che effettivamente la risposa è corretta |
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Aurora89
Nuovo Arrivato
Città: lecce
15 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:54:20
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| siiii...grazie, vi sono veramente riconoscente..purtroppo biochimica applicata si sta rivelando molto più pesante del previsto e la stanchezza si faceva sentire.. |
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Aurora89
Nuovo Arrivato
Città: lecce
15 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 19:55:45
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| ops ho dimenticato il risulato :) ok sono fusa :) ottengo 10 ul |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 20:12:23
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Scusatemi ma i vostri conti non tornano.
Se vuoi 4U/campione prendi 0.4 ul e li metti in ciascun campione, che sia 25ul, 100ul o 30l non cambia, sono sempre 4U/campione.
Se invece vuoi 4U/ul allora il discorso è diverso. |
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Aurora89
Nuovo Arrivato
Città: lecce
15 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 20:18:42
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| in concentrazioni finali si parla di 4u/campione. e dice che il volume finale è 25 ul. |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 20:31:50
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| Se si parla di 4U/campione, allora del volume finale non ti interessa nulla, perchè la tua unità di volume è "il campione", quale che sia il suo volume in ul. |
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roberta.s
Utente Junior
Città: Parigi
564 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 20:59:19
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Io mi trovo sempre bene con le proporzioni, e concordo con Chick80.
Voglio prendere 4 U di enzima dal suo stock che è 10 U/uL; dopodichè quelle 4 unità le devo aggiungere al campione, che in questo caso equivale a 25 uL, ma è irrilevante. Per fare ciò:
10 unità : 1 uL = 4 unità : x uL;
X = 4/10 uL = 0.4 uL
Quindi se 0.4 uL di soluzione enzimatica contengono 4 unità di enzima, prelevo 0.4 uL è li aggiungo al campione. |
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Aurora89
Nuovo Arrivato
Città: lecce
15 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 21:29:51
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| ok.vi ringrazio tanto, entrambi gentilissimi..buona serata |
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0barra1
Utente Senior
Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 30 gennaio 2012 : 22:04:37
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Che casino: io ho risolto per avere una concentrazione di 4 U/uL in 25uL, mi pareva che l'esercizio chiedesse proprio questo. Certo che se è come dite voi, allora era persino più facile e concordo con la vostra "soluzione". 
Allocco io a non leggere meglio. 
(e l'utente ad esprimersi come una sibilla cumana  ) |
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ramaya86
Nuovo Arrivato
46 Messaggi |
Inserito il - 06 novembre 2012 : 12:07:54
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ciao a tutti!! ho appena iniziato il laboratorio e mi hanno fatto vedere la lisi cellulare per estrarre la proteina che è oggetto di studio...nel procedimento, prima dell'estrazione hanno trattato il supernatante con DNasi ed RNasi e hanno messo 40 microl del primo e 80microl del secondo...però ho visto che la DNasi è un 20 U/microl e RNasi è 10 mg/ml e io devo fare il calcolo su quanto mettercene in base alla quantità di pellet iniziale che era 10ml!!! allora io ho provato a fare la proporzione con la RNasi ma non mi viene 80 microl mentre con la DNasi mi blocca questa Unità enzimatica ma( siccome ho letto i post precedenti ) devo considerare la U come microgrammi????? perdonate la domanda forse per alcuni sciocca...credevo di aver capito le diluizioni ma poi mi sono bloccata di nuovo a questo!!!
mi potete dare una mano???? GRAZIE !!!! |
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