Esercizio ricombinazione/complementazione

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Emy89
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17 Messaggi

Inserito il - 31 gennaio 2012 : 18:22:40

Salve a tutti, vorrei proporvi il testo di un esercizio che dovrei svolgere, :
Discuti in che modo verificheresti se due mutanti nella regione RII del fago T4 possono dare progenie per ricombinazione o complementazione. Che esperimento potresti allestire per verificare se possono complementare e quale per verificare se � possibile che si abbia progenie fagica per ricombinazione?
Inizio a postarlo, tra poco metter� il metodo con cui l'ho svolto.
Se potete iniziare a dare uno sguardo mi fareste un grande favore.
Grazie mille!

Emy89
Nuovo Arrivato

17 Messaggi

Inserito il - 31 gennaio 2012 : 20:25:21

Ecco lo svolgimento: nel caso di complementazione, facciamo un'infezione mista in E.coli ed ho 2 genomi fagici mutati in geni diversi. Se si produce progenie fagica, ho complementazione.

FAGO T4 MUTANTE 1 FAGO T4 MUTANTE 2

RIIA (MUTATO) RIIB (WT) RRIIA (WT) RIIB(MUTATO)

i due fagi infettano la cellula di coli K12 lambda(infezione mista) e nella cellula avviene la duplicazione del genoma fagico. Se si ha progenie fagica, significa che � avvenuta complementazione in quanto sono presenti tutti ne due i geni wild tipe.

Nel caso di Ricombinazione, dopo l�'infezione mista i due genomi fagici all'interno di Coli B possono ricombinare tra loro. Se ho due mutanti in geni diversi, questi possono ricombinare tra loro e daree urogine a duna progenie fagica ricombinante. La prima infezione avviene in coli b. Poi il lisato fagico viene piastrato su di una coltura di Coli K12 Lambda (infezione singola nn mista) solo i ricombinanti RIIA (WT) RIIB (WT) possono crescere.

Immagine:

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