ciao a tutti, sto iniziando un lavoro utilizzando la PCR real time ma ho un dubbio sugli housekeeping..devo scegliere uno che abbia circa l'espressione allo stesso ciclo del gene che sto studiando, giusto? Come faccio a sapere a quale ciclo si esprimono i vari hkg?? qualcuno di voi sa rispondermi? esistono delle tabelle? ad esempio gapdh a che ciclo si esprime?
No, attenzione, non č importante che venga espresso allo stesso livello del tuo gene (dire che č espresso ad un certo ciclo non č proprio corretto....). La cosa importante per scegliere l'housekeeping č che sia espresso costantemente e NON sia modulato dal tuo trattamento.
Di solito si usano 18S, GAPDH, qualcuno usa l'actina (ma attenzione se tratti con ormoni steroidei o fattori di crescita!).