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Autore

Discussione

Giusola
Nuovo Arrivato

Prov.: Matera
Città: Ferrandina

2 Messaggi

Inserito il - 12 dicembre 2006 : 15:06:47

come fa la transcripatasi inversa a sintetizzare il filamento coplementare a quello sintetizzato a partire dallo stampo a mRNA se non dispone di un 3'-OH libero?

valia
Moderatore

Prov.: UK

1001 Messaggi

Inserito il - 12 dicembre 2006 : 15:31:16

Infatti si usano Oligo d(T) come primer. Questi si appaiano alla coda di Poli(A) presente al 3' del cDNA.. E il gioco è fatto!

In questo modo ottieni UN filamento di cDNA complementare al filamento di RNA utilizzato nella reazione di retrotrascrizione. Per ottenere cDNA a doppio filamento basta a questo punto effettuare una normale PCR, con primer e taq normali!

atreliu
Amministratore

Prov.: Milano
Città: Milano

2484 Messaggi

Inserito il - 12 dicembre 2006 : 15:50:42

C'è una vecchia relazione che potrebbe fare al tuo caso.

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BUONE REGOLE DEL FORUM:
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Giusola
Nuovo Arrivato

Prov.: Matera
Città: Ferrandina

2 Messaggi

Inserito il - 13 dicembre 2006 : 09:47:06

Grazie mille per avermi chiarito le idee

Ciao a tutti e alla prossima!!!