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lunarossa76
Nuovo Arrivato

9 Messaggi

Inserito il - 29 febbraio 2012 : 16:00:44

ciao a tutti, devo fare una domanda:
ho 2

umani monoclonali, ottenuti dallo screening di una scFv phage library.
per poterli usare in western blot, come faccio a sapere quale anticorpo secondario devo scegliere?

grazie!

AleXo
Moderatore

Prov.: Estero
Citt�: San Francisco, California

1550 Messaggi

Inserito il - 29 febbraio 2012 : 19:42:53

dipende da cosa hai in mano scusa...

sono stati riformattati come full IgG (mouse o human? Quale isotipo)? Sono ancora ScFv (con o senza tag? e quale?)?

lunarossa76
Nuovo Arrivato

9 Messaggi

Inserito il - 15 marzo 2012 : 09:56:14

I 2 scFv sono stati inseriti a monte dei ch1-3 di igg umane per ottenere i rispettivi minibodies.
questi minibodies sono prodotti in cho o hek293 cells. Sono normalmente utilizzati come medium condizionato serum free o purificati mediante g-protein agarose.

io vorrei testarli in western e in immunofluorescenza, ma non so come poter selezionare un anticorpo secondario adatto per la rilevazione

AleXo
Moderatore

Prov.: Estero
Citt�: San Francisco, California

1550 Messaggi

Inserito il - 15 marzo 2012 : 18:42:47

proteinA-HRP dovrebbe funzionare come secondario