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Autore

Discussione

Biotecgen
Utente Junior

Citt�: Napoli

191 Messaggi

Inserito il - 15 dicembre 2006 : 18:55:23

Salve a tutti. Mi dareste un aiutino nel capire la tecnica OLA? innanzitutto perch� � una tecnica usata per la ricerca di mutazioni note? e perch� viene utilizzata una sonda comune? e perch�....
HELP ME, PLEASE!
Grazie.

non esistono domande indiscrete...le risposte a volte lo sono.

Luis 22
Utente

Citt�: Bari

755 Messaggi

Inserito il - 15 dicembre 2006 : 19:04:50

OLA-PCR:

- Dopo la PCR, si usano 2 tipi di sonde diverse.
- Le prime sono sonde specifiche sia per la sequenza normale che mutata e presentano al 5� dei modificatori di mobilit� di diversa lunghezza, per favorire la separazione in una corsa elettroforetica.
- Il secondo tipo sono sonde (fosforilate in 5� e legate ad una molecola fluorescente in 3�) complementari alla sequenza adiacente alla mutazione in esame
- Si usa dopo una ligasi che unisce questi due tipi sonde che si sono legate al DNA bersaglio, discriminando tra quelle con complementariet� completa ed incompleta
- La visualizzazione dei risultati avviene mediante elettroforesi capillare

La vita e i sogni sono fogli di uno stesso libro. Leggerli in ordine � vivere, sfogliarli a caso � sognare. (Arthur Schopenhauer)&