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Cesca
Nuovo Arrivato
Prov.: Mantova
Città: Mantova
9 Messaggi |
 Inserito il - 18 dicembre 2006 : 12:49:46
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spero sia l'area giusta...
sto studiando la clonazione del gene per l'interferon.. so che prima di tutto bisogna indurre leucociti con un virus,per poi estrarre gli mRNA,convertirli in cDNAss, poi in cDNAds, clonarli in vettori plasmidici coi quali si trasformano cells di E. Coli; poi si saggiano le colonie con RNA marcato proveniente da cells indotte in presenza di un eccesso di RNA non marcato, e dalle colonie marcate si estraggono i plasmidi,, li si linearizza e li si fissa su carta da filtro....
qui mi perdo... 
mi vien detto che con i plasmidi linearizzati si creano lotti ai quali viene aggiunto RNA da cells indotte; questo si ibrida con DNA che codifica per proteine indotte e viene saggiato con traduzione in vitro per identificare i lotti di DNA plasmidico che codificano per l'interferon..
io non ho capito...i lotti come si creano? se ho 20 colonie un lotto-tipo può essere l'insieme dei plasmidi linearizzati delle colonie che vanno da 1 a 10?..poi con la traduzione come capisco che viene prodotto interferon?che mzzi ho per capirlo?
 ringrazio chiunque mi dia una risp..o almeno ci provi!
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clonazione interferon
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