estrazione proteica con sonicatore

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dany
Nuovo Arrivato

24 Messaggi

Inserito il - 03 aprile 2012 : 10:28:03

Ciao a tutti.

Io devo effettuare una lisi cellulare mediante sonicatore, mai fatto prima d'ora. Vi volevo chiedere se qualcuno di voi potrebbe darmi qualche dritta per l'impostazione del programma. Quindi i valori ottimali da impostare per: amplitude, Power, Energy, Probe temperature e process time, ed effettuare quindi una buona estrazione e frammentazione del DNA.
ringrazio chiunque mi aiuti

mollichina di pane
Utente Junior

121 Messaggi

Inserito il - 03 aprile 2012 : 14:37:19

Ciao Dany!
che cellule usi?
dipende anche da quello...

dany
Nuovo Arrivato

24 Messaggi

Inserito il - 03 aprile 2012 : 14:59:26

ciao Mollichina, ho una linea cellulare di carcinoma prostatico.
E non ho idea di come impostare il programma per sonicarle, vorrei avere delle indicazioni su che percentuale di amplitude posso utilizzare (0-100%) e sugli altri parametri che ho scritto sopra come la temperatura ecc...
Ti ringrazio tantissimo se riesci ad aiutarmi

memole
Utente Junior

Prov.: Brindisi
Citt�: brindisi

577 Messaggi

Inserito il - 04 aprile 2012 : 09:23:54

Io lisavo i linfociti in ghiaccio a 40 duty cycle (gli altri paramenti onestamente non li ricordo). Ti consiglio di fare la lisi a freddo perch� il sonicatore scalda e rischi di degradare il campione.

mollichina di pane
Utente Junior

121 Messaggi

Inserito il - 05 aprile 2012 : 12:50:49

Purtroppo non posso esserti utile...
...fino ad ora ho sonicato solo cellule batteriche con cicli da 5 impulsi da 30 sec al 20% della potenza...
ovviamente in ghiaccio!
Non ho neanche tempo in questo momento per cercare qualche articolo a riguardo...
...posso solo dirti che eventualmente ci sono anche altre metodi oltre al sonicatore.
In caso facci sapere se possono interessarti. Se nei prossimi giorni trovo qualcosa in rete, ti faccio sapere.