gel di poliacrilammide che "collassa" durante la corsa

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Elena27
Nuovo Arrivato

1 Messaggi

Inserito il - 27 giugno 2012 : 17:14:25

Ciao a tutti, sono una nuova iscritta al forum. Vi sottopongo il mio problema: il mio gel di poliacrilammide � letteralmente "collassato" durante la corsa! Si tratta di un gel nativo fatto a mano, ad una percentuale del 6%; � stata effettuata una pre-corsa a 100 V per circa 30 minuti e la corsa � stata condotta allo stesso voltaggio per circa un'ora e mezza. Per la prima ora � andato tutto bene, poi il gel ha incominciato ad accartocciarsi e a deformarsi. Ho fatto tante corse elettroforetiche per western blot e non mi era mai successa questa cosa! Ora sono alle prime armi con un saggio EMSA e non riesco a capire perch� il gel si comporta cos�.... Per caso c'� qualcuno a cui � successo la stessa cosa e ha capito quale pu� essere il problema? Temperatura? Tampone di corsa (sto usando un tampone trovato in letteratura composto da Tris pH 7.5, EDTA e sodio acetato)? Qualsiasi consiglio � ben accetto! Grazie!

0barra1
Utente Senior

Citt�: Paris, VII�me arrondissement

3847 Messaggi

Inserito il - 27 giugno 2012 : 17:29:01

Bassa percentuale pi� effetto joule pi� tempo di corsa?
Mai successo personalmente, ma neanche mai corso in tali condizioni...

So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

Martin.diagnostica
Utente Attivo

1582 Messaggi

Inserito il - 27 giugno 2012 : 17:58:56

dopo aver aggiunto l'APS mescoli vigorosamente la soluzione di acrilammide? Oppure la cameretta � surriscaldata? se si puoi usare del running freddo

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