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Simona84
Utente Junior
Città: milano
131 Messaggi |
 Inserito il - 31 luglio 2012 : 15:33:13
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Ciao!
Avrei una domanda sul cell invasion assay. per farlo utilizzerò un kit che utilizza la camera di boyden come supporto. Il protocollo prevede di mettere le cellule all'interno del supporto in un medium senza siero (o con una percentuale molto bassa tipo 1%) e invece mettere un medium con siero al 10-20% come chemoattraente nella well.
Bene il mio problema sono le cellule che sto utilizzando. Sono cancer stem-like cells (o tumor initating cells, come preferite chiamarle) derivati da glioblastoma multiforme. queste cellule crescono in un medium (Neurobasal:dmem f12 oppure Euromed) privo di siero con aggiunta di EGF e FGF. Mi chiedevo visto che sono fattori di crescita possono essere dei chemoattraenti, quindi mi stavo chiedendo se non devo metterli nel medium senza siero all'interno del supporto ma solo nel medium all'interno della well.
Qualcuno di voi ha mai fatto questo saggio su cellule che crescono già in medium privi di siero ma con fattori di crescita e potrebbe darmi qualche consiglio?
PS: ho già guardato un pò su pubmed e purtroppo come al solito la sezione mat e metodi non è assolutamente esplicativa!!
grazie!!
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Cell invasion assay
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