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 Immunofluorescenza su tessuto non perfuso		  Nuova Discussione  Nuovo Sondaggio Nuovo Sondaggio
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supererry
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Scrubs
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82 Messaggi
Inserito il - 19 settembre 2012 : 23:01:05  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di supererry Invia a supererry un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti,

qualcuno conosce un protocollo per immunofluorescenza su tessuto non fissato? (animale non perfuso, prelievo del tessuto e posto in fissativo overnight).

Il protocollo e' uguale? come se fosse su tessuto perfuso o cambia qualcosa?

grazie

chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi
Inserito il - 19 settembre 2012 : 23:21:14  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
A seconda del volume del tessuto io lo lascerei anche un pochino più che o/n, ma altrimenti è identico.

Avrai probabilmente un pochino più di rumore di fondo se usi fluorescenza.
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supererry
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82 Messaggi
Inserito il - 20 settembre 2012 : 01:08:47  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di supererry Invia a supererry un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Meglio una DAB??

Grazie per la risposta
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi
Inserito il - 20 settembre 2012 : 08:49:02  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Dipende veramente dall'anticorpo che usi, io lo faccio in routine per molti anticorpi (cervello di topo adulto) senza alcun problema. E' sicuramente molto più veloce che fare la perfusione, quindi -se funziona- il gioco vale la candela.

Purtroppo non c'è una regola generale, devi provare :).
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