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Discussione |
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MCV91
Nuovo Arrivato
106 Messaggi |
 Inserito il - 18 ottobre 2012 : 15:28:35
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Qual è la differenza tra topi transgenici e topi knock in/ knock out???
Ci terrei davvero a capirlo dato che sul mio libro questo argomento non è spiegato in modo chiaro!
Grazie!!! 
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
 Inserito il - 18 ottobre 2012 : 16:24:25
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Sono di fretta, ma in breve in un topo transgenico inserisci l'inserto nel DNA ma non sai dove, mentre in un KI/KO fai un targeting di una regione specifica.
Inoltre spesso i transgenici hanno più copie del transgene inserito.
A livello pratico, inoltre, ci sono delle differenze nel senso che, a meno di fare uno studio approfondito per capire dove è il transgene, non puoi -via PCR- sapere se un topo è omozigote o eterozigote. |
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MCV91
Nuovo Arrivato
106 Messaggi |
Inserito il - 18 ottobre 2012 : 18:07:35
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Grazie chick, già mi è più chiaro
La mia domanda ora è: Nel caso del topo transgenico il transgene rappresenta la forma mutata del gene che è cmq presente in duplice copia sui cromosomi omologhi, giusto?? A questo punto io mi chiedo in questo caso valgono sempre le leggi della dominanza/recessività?? Nel senso, se il transgene è recessivo rispetto al gene presente in duplice copia sui cromosomi omologhi non si esprime???
Non so se mi sono spiegata.....
HELP!!! |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 18 ottobre 2012 : 18:55:11
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Sì valgono sempre le stesse leggi. Tuttavia questa frase è scorretta:
Citazione:
se il transgene è recessivo rispetto al gene presente in duplice copia sui cromosomi omologhi non si esprime???
Il transgene si esprime in ogni caso (se ci sono i buoni fattori di trascrizione etc.) quello che è recessivo (ossia non si vede) è il suo *fenotipo*.
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 18 ottobre 2012 : 19:25:34
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Beh dipende anche dal "gene" che inserisci, se inserisci un gene che nel topo non esiste, ovviamente non avrai omologhi sugli altri cromosomi.
Poi dipende da cosa vuoi fare, ad es. fare un topo transgenico inserendo un allele recessivo di un gene che un topo ha già ma di cui ha l'allele dominante, qualunque cosa sia quel gene, non mi sembra una gran trovata! Uno perderebbe tempo a fare una cosa del tutto inutile!
Comunque cancello l'altro tuo messaggio visto che è un doppione di questo. Per quesiti molto simili per favore continua nella stessa discussione. |
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MCV91
Nuovo Arrivato
106 Messaggi |
Inserito il - 19 ottobre 2012 : 07:44:15
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Prima di tutto, grazie 1000 a tutti! Mi state dando un grande aiuto 
GFPina, quindi io posso aggiungere anche un gene che nel topo non esiste?? Wow!
Era proprio questo che volevo capire!!! Grazieee :) |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 19 ottobre 2012 : 07:59:19
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Certo, ad esempio una cosa estremamente comune è inserire delle proteine fluorescenti, ad es. GFP (green fluorescent protein) sotto dei promotori specifici.
Ad es. se inserisci un costrutto [PROM XYZ]---GFP tutte le cellule in cui il promotore XYZ è attivo saranno verdi. |
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MCV91
Nuovo Arrivato
106 Messaggi |
Inserito il - 19 ottobre 2012 : 15:35:47
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Siete fantastici, grazie!
Ora che ci sono approfitto per chiedervi un'ultima cosa... sul mio libro c'è scritto che lo zigote in cui vengono iniettati i transgeni darà origine ad un topo "chimera". Sarà una chimera perchè lo zigote si divide e l'integrazione del transgene avviene dopo e per cui si formano 2 linee cellulari diverse (una caratterizzata dalla presenza del transgene, l'altra dalla sua assenza?) ?????
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Discussione |
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Differenza topi transgenici e topi knock in/out
