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 inattivazione fosfatasi endogena
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nannuto
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33 Messaggi

Inserito il - 25 ottobre 2012 : 14:30:25  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di nannuto Invia a nannuto un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
salve a tutti! dovrei fare un'immunoistochimica su sezioni di tessuto incluso in paraffina utilizzando la fosfatasi alcalina come enzima che sviluppa la reazione. E' necessaria secondo voi una preventiva eliminazione della fosfatasi endogena (come si fa quando si sviluppano le reazioni con perossidasi) o non è necessario tale passaggio? se sì, qualcuno mi potrebbe consigliare come farla? Grazie mille!!!

SpemannOrganizer
Utente

Spemann

Città: Los Angeles


955 Messaggi

Inserito il - 26 ottobre 2012 : 01:59:32  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di SpemannOrganizer Invia a SpemannOrganizer un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
non ho fatto immunoistochimiche con alkaline phosphatase,ma piu' o meno lo stesso problema si presenta con le in situ: si usa un anticorpo anti-dig coniugato con AP, e per eliminare o quantomeno ridurre il rumore di fondo utilizziamo un inibitore delle fosfatasi alcaline, il Levamisole. Penso che si possa utilizzare anche sulle cellule, ma sarebbe meglio se tu dessi una occhiata a protocolli gia' esistenti e alla letteratura. Di sicuro ne troverai a migliaia

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