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CRISTIAN
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92 Messaggi

Inserito il - 15 marzo 2013 : 11:13:31

Salve a tutti.
Avrei bisogno per favore di un consiglio riguardo alla quantificazione in real time PCR.
Ho una casistica di numerosi pazienti e vorrei quantificare alcuni geni con queste modalit�, ditemi voi per favore se � corretto.
Ho effettuato una curva standard con il gene target (e una con housekeeping) di un pool di cDNA (estratto e retrotrasc da RNA tot) a diluizioni seriali (il primo a conc 100 ng, e via a via diluizioni 1:10, 1:100. 1:1000 ecc). Ora i campioni incogniti li ho quantificati estrapolando dai cicli soglia ottenuti, la concentrazione di partenza del mio cDNA. La stessa cosa ho fatto per il gene housekeeping. Quindi per quantificare il mio campione incognito ho effettuato il rapporto tra la quantit� del target/quantit� housekeeping. Il valore che ottengo � per esempio (10ng/5ng=2).
Il valore ottenuto ha qualche unit� di misura? Posso semplicemente esprimerlo come 2 e basta?
� corretto?
Grazie a tutti