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AntonioSillo
Nuovo Arrivato
61 Messaggi |
 Inserito il - 13 maggio 2013 : 15:35:41
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Ciao Ragazzi;
qualcuno di voi ha mai fatto il trasferimento di un gel di PA colorato con coomassie o coomassie colloidale? interferisce in qualche modo con l'ibridazione con anticorpi o con l'ECL?
sapete se bisogna cmq fissare al gel le proteine prima di colorare?
Grazie mille,
Sillo
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 13 maggio 2013 : 18:27:26
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| Se fai una colorazione acquosa (non fissi le proteine!) puoi blottare il gel, altrimenti NO! |
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AntonioSillo
Nuovo Arrivato
61 Messaggi |
Inserito il - 13 maggio 2013 : 21:13:47
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Grazie per la risposta... ma non mi è molto chiara una cosa...
come posso colorare il gel se prima non fisso le proteine? se non le fisso, quando metto a bagno il gel nel coomassie se ne escono dalle maglie, e come se non bastasse la policrilammide ha un'indice di swelling abbastanza alto in acqua, quindi a maggior ragione le proteine se ne scappano.
ma tu l'hai mai fatto?
interferisce in qualche modo il coomassie con il trasferimento e l'ibridazione con anticorpi?
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Western Blotting di gel colorati con coomassie colloidale
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