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Atterual
Nuovo Arrivato



5 Messaggi
Inserito il - 27 giugno 2013 : 12:10:34  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Atterual Invia a Atterual un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti. Ho cercato nel forum ma non ho trovato delle informazioni utili riguardo all'utilizzo delle colonnine di purificazione del DNA plasmidico (in particolare plasmid miniprep kit della BIORAD). Non capisco come funzioni esattamente il Washing buffer che elimina solamente le impurità ma lascia legato il DNA alla matrice in silice, mentre quando si fanno i lavaggi con l'H2O il DNA si stacca. Come fa l'H2O a staccare gli acidi nucleici? ed il washing buffer nn contiene H2O?
[Alcuni link di conversazioni vecchie non funzionano più ]

domi84
Moderatore

Smile3D

Città: Glasgow


1724 Messaggi
Inserito il - 27 giugno 2013 : 16:02:29  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di domi84 Invia a domi84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Solitamente quei wash solution contengono un'alta percentuale di etanolo (70%) che fa precipitare il DNA, che quindi resta bloccato nella resina. Quando aggiungi acqua il DNA si risospende e attraversa la resina...
Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...
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Atterual
Nuovo Arrivato



5 Messaggi
Inserito il - 27 giugno 2013 : 16:53:05  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Atterual Invia a Atterual un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ok grazie! nel frattempo avevo trovato anche che dipende dalla costante dielettrica... però va bene così, abbastanza chiaro! :)
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GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8408 Messaggi
Inserito il - 27 giugno 2013 : 17:24:54  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da Atterual

ok grazie! nel frattempo avevo trovato anche che dipende dalla costante dielettrica... però va bene così, abbastanza chiaro! :)

Beh in realtà è la stessa cosa, la costante dielettrica cambia appunto passando da alcol ad acqua!

Comunque è stato spiegato parecchie volte (strano che tu non lo abbia trovato) ad es. ti linko queste:
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=13562#63812
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=10773#51490
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=13753
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Atterual
Nuovo Arrivato



5 Messaggi
Inserito il - 27 giugno 2013 : 17:52:48  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Atterual Invia a Atterual un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ah va bene... non trovavo nulla perchè cercavo troppo specificatamente la purificazione con la colonnina
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