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cuccurullom
Nuovo Arrivato
Città: napoli
14 Messaggi |
 Inserito il - 28 febbraio 2007 : 12:16:47
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Il protocollo è abbastanza lungo.
Comunque, taglia la banda e mettila in 50ul di ammonio bicarbonato 100mM.
Aggiungi un ugual volume di Acetonitrile ed aspetta 10 min. Rimuovi tutto ed aggiungi solo 50 ul di acetonitrile. Per un'efficace decolorazione, ripeti l'operazione 3-4 volte.
Riduci le proteine con 30ul di Ditiotreitolo 10mM (30min a 56°C) ed alchila con 30ul di Iodacetammide 50mM (20min RT DARK). Rimuovi tutto, lava con ammonio bicarbonato ed acetonitrile come sopra.
Digerisci con 30ul di tryp 6ng/ul, 37°C ON. Acidifica al mattino con TFA finale 0.1%.
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Spettr MASSA
Didattica e Relazioni
Inserito il - 19 febbraio 2007 : 23:37:50
