Ciao!!! ho un dubbio per quanto riguarda la cromatografia... il principio l'ho capito (discorso fase mobile fare stazionaria)...credo di essermi persa però in cosa consiste e a cosa serve l'equilibratura.. e soprattutto... come si rigenera una colonna cromatografica? Nel caso specifico si tratta di una cromatografia di affinità...
L'equilibratura serve a creare le migliori condizioni di pH e forza ionica tali da permettere un efficace legame tra la proteina target e la resina funzionalizzata all'interno della colonna. Durante l'utilizzo della colonna con le diverse purificazioni la resina si "scarica" cioè perde degli ioni metallici, si ha così una riduzione di efficienza di legame. In questo caso la resina va da prima liberata da tutti gli ioni metallici usando un chelante, ex. EDTA, e poi ricaricata con il metallo usando dei sali come NiSO4..