Precipitazione proteine con TCA

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snooze89
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 26 giugno 2014 : 12:54:56

Salve a tutti.
Premetto che sono un chimico e per un lavoro di tirocinio mi sto addentrando in un mondo per me del tutto (o quasi) nuovo.
In altre parole non capisco il motivo di un passaggio nella procedura atta alla quantificazione delle proteine.
Spiego brevemente:
- addizionato TRIS ad alimento tritato
- centrifugazione
- il surnatante ottenuto dovrebbe darmi indicazioni relative alla quantit� totale di proteine presenti, giusto?
- addiziono acido tricloroacetico (TCA)
- centrifugo
- prendo il surnatante e QUANTIFICO le proteine solubili in TCA utilizzando triptofano come standard per via spettrofotometrica.

La mia domanda �: perch� usiamo TCA? Non causa, essendo un acido forte, una denaturazione delle proteine? Cosa rimane effettivamente in soluzione?

Grazie mille!

snooze89
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 26 giugno 2014 : 12:56:49

L'attivit� proteolitica di enzimi perch� viene fatta sulla frazione solubile in TCA?