DAB NBT/BCIP double staining

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miosina87
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 10 luglio 2014 : 17:12:33

Ciao a tutti,
ieri ho effettuato su tessuto una doppia colorazione immunoistochimica (DAB NBT/BCIP) ma purtroppo non sono riuscita ad ottenere il risultato sperato.
In particolare le singole colozioni sono riuscite ma sulle fettine con la doppia ho perso il segnale della DAB con un'intensificazione del Blu negli stessi punti.
Avendo utilizzato il sistema biotina streptavidina per entrambi i secondari (prodotti in rabbit) credo che il problema possa essere stato nella fase tra la prima e la seconda colorazione in cui ho effettuato dei lavaggio con Glicina-HCL e Urea.
Qualcuno potrebbe darmi qualche suggerimento o allegarmi un protocollo a cui fare riferimento?