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lab89
Nuovo Arrivato
3 Messaggi |
Inserito il - 08 ottobre 2014 : 17:32:34
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Ciao a tutti, devo amplificare il cDNA di un gene. Mi hanno dato i primers che si trovano all'inizio del 5' e alla fine del 3' del mio gene e quindi so anche la Tm dei primers. Ma mi chiedevo dato che amplificherò tutto il cDNA del mio gene, devo aumentare il tempo di annealing considerando che il cDNA del mio gene è lungo quasi 2000 bp? Grazie
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0barra1
Utente Senior
   

Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 08 ottobre 2014 : 17:45:10
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Allungare rispetto a quale tempo? |
So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today. A Universe From Nothing, Lawrence Krauss
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GFPina
Moderatore
    

Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 08 ottobre 2014 : 19:04:21
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Casomai devi aumentare l'extension, non l'annealing! Il tempo dipende dall'enzima che utilizzi. |
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lab89
Nuovo Arrivato
3 Messaggi |
Inserito il - 09 ottobre 2014 : 12:44:26
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Scusate volevo scrivere extension! L'enzima è una GoTaq che ho controllato che estende 1min/kb. Grazie |
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midichloria
Nuovo Arrivato
75 Messaggi |
Inserito il - 09 ottobre 2014 : 16:26:09
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Quindi avendo 2kb=2 minuti :) |
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