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checcadr
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 10 ottobre 2014 : 18:48:35

Buonasera a tutti

Sto per iniziare la mia prima esperienza di laboratorio e avrei bisogno di alcuni chiarimenti su come preparare una soluzione. La soluzione comprende:
- TRIS HCl pH 7.4 50mM
- Saccarosio 1M
- DTT 1M
- EDTA 100mM
- H2O
- IP (Protease Inhibitors) 500x
il tutto in 10mL totali.
C'è qualcuno così gentile da potermi spiegare come fare?

midichloria
Nuovo Arrivato

75 Messaggi

Inserito il - 10 ottobre 2014 : 19:12:57

Ciao!
Tutto dipende dalle concentrazioni iniziali dei vari componenti.
Basta usare una formula rapidissima che é: Ci x Vi = Cf x Vf (cioé concentrazione iniziale per volume iniziale é uguale a concentrazione finale per volume finale).
Quindi se per esempio la concentrazione iniziale di Tris HCl é 1M, basta fare:
1000 mM x Vi = 50mM x 10 mL
Il volume che dovrai prelevare é quindi 0.5 mL.
E via dicendo per le altre cose.

Per quanto rigurda invece IP, deve trovarsi diluito 500 volte nella tua soluzione finale. Quindi 10 mL/500= 0,02 mL cioé 20 µL.

Alla fine fai il calcolo di tutto quello che hai messo e aggiungi la quantitá d'acqua che ti serve per arrivare ai 10mL finali :)

checcadr
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 11 ottobre 2014 : 16:04:48

Grazie mille..molto gentile!