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purplerock1987
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71 Messaggi

Inserito il - 19 maggio 2015 : 11:50:40

Ciao a tutti!
Sto cercando di capire se le cellule che possiedo esprimono o meno un certo gene.
Dopo aver fatto estrazione di rna e retro, ho fatto la pcr dell'hkg (GAPDH). Purtroppo lo vedo sia negli rt+ che negli rt-. Negli rt+ ho meno bandine faint aspecifiche in altre posizioni.
Ho fatto poi la pcr per il mio gene:
controlli negativi effettivamente negativi,
acqua di controllo caricata con mix pulita,
full lenght della proteina di controllo perfetta,
il problema e' che vedo negli rt- il mio trascritto, mentre gli rt+ sono venuti puliti! Come mai? :O

Grazie a chiunque mi aiutera'!

purplerock1987
Nuovo Arrivato

71 Messaggi

Inserito il - 20 maggio 2015 : 14:58:10

Nessuno? :D

Lapinella
Nuovo Arrivato

1 Messaggi

Inserito il - 16 giugno 2015 : 20:37:01

Ciao a tutti approfitto di questo spazio x fare una domanda sul bianco di pcr: � necessario usare acqua sterile al posto del templato oppure pu� essere sufficiente solo la master mix? Se ad esempio il volume di reazione della pcr e' di 25 micro litri posso semplicemente fare il bianco usando 25microlitri di mix? Grazie mille a tutti!

Ftoresearch
Nuovo Arrivato

8 Messaggi

Inserito il - 17 giugno 2015 : 17:38:56

Certamente, puoi utilizzare la tua mix, in cui metti tutto eccetto il templato.