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tweety
Nuovo Arrivato
Città: pescara-chieti
10 Messaggi |
Inserito il - 18 marzo 2007 : 16:01:25
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ciao a tutti,potete darmi qualche info su questa tecnica?grazie mille
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Giuliano652
Moderatore
Prov.: Brescia
6941 Messaggi |
Inserito il - 19 marzo 2007 : 10:27:00
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La Chromatin Immunoprecipitation (o ChIP) è una tecnica mediante la quale si riesce a rilevare l'effettivo legame di un qualunque fattore di trascrizione al DNA. Detta in maniera molto semplicistica: si stimolano le cellule in qualche maniera, dopo la stimolazione si vuole studiare la cinetica di legame di un determinato fdt al DNA, non si fa altro che, a vari tempi, fissare le cellule, estrarre il DNA nucleare, frammentarlo (io l'ho fatto con sonicazione),fare un'immunoprecipitazione con un anticorpo legante il nostro fdt per selezionare il frammento di DNA legato ad esso, separare la parte proteica dal DNA, fare una PCR per amplificare il frammento e fare un gel di agarosio per evidenziare i risultati. Più la banda è intensa, più frammenti hai per quel punto, quindi vuol dire che c'era più proteina legata al DNA. Se non hai bande per uno o più punti temporali vuol dire che a quel tempo il fdt non legava il DNA. |
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