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MarziaRa
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1 Messaggi

Inserito il - 21 marzo 2016 : 22:10:04  Mostra Profilo Invia a MarziaRa un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti. Vorrei maggiori chiarimenti sulla tecnica di immunoprecipitazione. Allora se voglio eseguire una IP con delle proeine ectopiche che presentano 2 tags diversi (Myc e HA) e immunoprecipito per la proteina cche presenta il teg Myc, cosa usero' come controllo negarivo? le cellule non trasfettate immunoprecipitate con Myc? o cosa?

Geeko
Utente

Ctenophor1.0

Città: Milano


1043 Messaggi

Inserito il - 22 marzo 2016 : 08:48:54  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Geeko Invia a Geeko un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Le cellule non trasfettate immunoprecipitate con l'anti-Myc è un buon controllo che farei anche io per testare la specificità dell'anticorpo. Poi dovresti includere anche un'IP con un anticorpo dello stesso isotipo del tuo anti-Myc, usato sempre come controllo negativo (ad esempio un anti-flag) per capire quale sia il background aspecifico di IP.


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