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Autore

Discussione

scorza
Nuovo Arrivato

Prov.: Palermo
Città: palermo

30 Messaggi

Inserito il - 05 aprile 2007 : 11:47:38

Salve, mi sono appena registrata.
sono una studentessa di scienza biologiche, tra poco avrei un esame pero' ho alcuni dubbi su alcune tecniche;
c'è differenza tra la tecnica SKY E LA MULTIPLEX FISH?
io so che le due tecniche servono per visualizzare i cromosomi in diversi colori.
quale è la differenza?
grazie

chick80
Moderatore

Città: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 06 aprile 2007 : 00:37:42

Sono simili come idea, lievemente differenti come protocollo.

La FISH usa cinque differenti fluorofori e la lettura del cariotipo avviene eccitando separatamente le singole lunghezze d'onda. A questo punto per ogni pixel viene controllato se il particolare fluoroforo è presente o meno. Un apposito software determina quindi a che cromosoma appartenga ciascun pixel dell'immagine a seconda dei fluorofori presenti o meno in quella regione.
Il paper originale è questo :Karyotyping human chromosomes by combinatorial multi-fluor FISH. (purtroppo a pagamento, ma dall'università lo potrai sicuramente leggere)

Lo SKY (spectral karyotyping) invece usa sempre vari fluorocromi ma li eccita tutti insieme e va a guardare lo spettro di emissione.
Vedi:
Paper originale : Multicolor spectral karyotyping of human chromosomes. (anche questo a pagamento)
e una semplice spiegazione della tecnica
http://www.genome.gov/10000208

Una terza alternativa è il CCK (colour changing karyotyping) che richiede solo l'uso di 3 fluorofori e può essere fatto con un normale microscopio a fluorescenza.
Vedi: Colour-changing karyotyping: an alternative to M-FISH/SKY

C'è anche da notare che queste tecniche non sono esatte al 100%, ma in rari casi possono dare risultati erronei:
Limitations of chromosome classification by multicolor karyotyping.

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scorza
Nuovo Arrivato

Prov.: Palermo
Città: palermo

30 Messaggi

Inserito il - 06 aprile 2007 : 12:11:12

ma c'è differenza tra la fish, multiplex fish e multicolor fish???
grazie per la risposta di prima è stata molto chiara!

Er Mungo
Nuovo Arrivato

Prov.: Roma
Città: Roma

4 Messaggi

Inserito il - 12 giugno 2007 : 18:19:46

ciao,sono uno studente di biotecnologie,a breve devo dare l'esame di genetica e volevo sapere se qualcuno sapeva il limite di risoluzione della FISH,della SKY,M-Fish....ve ne sarei immensamente grato;)