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Sofia Gasperini
Nuovo Arrivato
6 Messaggi |
 Inserito il - 22 aprile 2017 : 12:46:21
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Ciao a tutti :)
stavo leggendo un articolo per un esame e non ho capito questo passaggio che riporto:
(si sta valutando l'effetto del flavonoide luteolina sullattività di NF-#954;B LPS-indotto)
"Therefore, we next sought to determine whether luteolin prevents LPS-induced NF-#954;B activity. IEC-18 cells were infected for 16 hr with an adenoviral vector encoding an NF-#954;B-luciferase reporter gene (Ad5-#954;B-LUC), pretreated with various doses of luteolin for 1 hr and then stimulated with LPS (10 µg/ml) for 12 hr. In addition, cells were infected with Ad5IkB#945;AA and Ad5dnIKK#946; to selectively block NF-#954;B activation. As shown in Fig. 1(b), luteolin dose-dependently inhibited LPS-induced NF-#954;B transcriptional activity in IEC-18 cells. However, CMV promoter-driven luciferase activity is not blocked by luteolin, suggesting that this flavonoid is not inhibiting luciferase activity per se (data not shown). As expected, Ad5IkB#945;AA and Ad5dnIKK#946; also blocked LPS-induced NF-#954;B activity in IEC-18 cells."
Link all'articolo completo dove i simboli vengono visualizzati correttamente: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1782165/
Non ho capito a cosa servono Ad5IkB#945;AA and Ad5dnIKK#946; 
Pensavo che essendo teoricamente entrambi geni codificanti per proteine che hanno come effetto quello di liberare NF-kB servissero avalutare l'effetto della luteolina su questo senza che altri fattori lo blocchino. Però alla fine si dice che anche questi 2 geni bloccano l'attività di NF-kB.
Vi chiedo aiuto a capirci qualcosa 
Grazie
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domi84
Moderatore
Città: Glasgow
1724 Messaggi |
Inserito il - 22 aprile 2017 : 17:55:32
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| IkBalphaAA e dnIKKbeta sono 2 proteine della via di segnalazione di NF-kB con delle mutazioni, per cui non sono più funzionanti. IkBalpha wt e' un inibitore di NF-kB e IkBalphaAA è la forma mutante che non può essere degradata. IKKbeta wt è la chinasi, mentre dnIKKbeta (Dominant Negative) che blocca la chinasi. Sono 2 controlli usati per dimostrare che l'effetto su NF-kB era specifico di NF-kB e non dovuto a qualche altra cosa che trascriveva Luc. |
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Le foto che ho scattato... |
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Sofia Gasperini
Nuovo Arrivato
6 Messaggi |
Inserito il - 23 aprile 2017 : 12:06:10
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Ok grazie :)
Quindi, dato che a me è richiesto un livello più basso di approfondimento, se dico semplicemente che questi geni servono a controllare che non vi siano interferenze con la sintesi/reazione/quantificazione della luciferasi può avere senso? |
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domi84
Moderatore
Città: Glasgow
1724 Messaggi |
Inserito il - 24 aprile 2017 : 21:42:36
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| Io direi: questi geni servono a controllare che la trascrizione della Luc sia dovuta effettivamente ad NF-kB e non ad un altro fattore che potrebbe interferire. |
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Sofia Gasperini
Nuovo Arrivato
6 Messaggi |
Inserito il - 25 aprile 2017 : 18:19:02
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| Ok, grazie mille :) |
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Luciferasi
Didattica e Relazioni
