Ciao ragazzi, sono una studentessa alle prime armi con poca esperienza di laboratorio. Ho difficoltà nello spiegare quest'elettroforesi nella mia relazione di laboratorio (ho riportato l'immagine negli allegati). In pratica dopo aver precipitato il dna, siamo andati a digerirlo con enzimi di restrizione e separato i frammenti ottenuti. Il nostro DNA digerito deve essere sotto le 6kb, ovvero sotto la terza banda (rossa nell'immagine)..ma sinceramente non sono come interpretare questo gel..da quello che vedo ci sono 4 smear e le bande si vedono pochissimo. Lo smear è dovuto al fatto che gli enzimi di digestione tagliano in maniera diversa producendo frammenti di dimensioni differenti?
Ciao Diana. Questa non è una chat, quindi di solito ci vuole un po' per avere una risposta. Che tipo di DNA hai digerito? Plasmidico? Genomico? Che enzimi hai usato? Ci sono diverse possibilità... Secondo me le più probabili sono che si è degradato il DNA o per qualche motivo non l'hai precipitato... Fornisci più informazioni se puoi. Ciao
è che avevo postato 3 volte questa domanda e non avevo mai avuto risposta Ti ringrazio cmq! Il dna è di tipo genomico e gli enzimi utilizzati sono Hind III, XbalI, BsrGI e SspI..poi è stata fatta una seconda digestione con EcoRI.
Citazione:Messaggio inserito da domi84
Ciao Diana. Questa non è una chat, quindi di solito ci vuole un po' per avere una risposta. Che tipo di DNA hai digerito? Plasmidico? Genomico? Che enzimi hai usato? Ci sono diverse possibilità... Secondo me le più probabili sono che si è degradato il DNA o per qualche motivo non l'hai precipitato... Fornisci più informazioni se puoi. Ciao
C'è qualcosa che mi sfugge...hai preso il dna genomico di una cellula, l'hai digerito con 5 enzimi...cosa ti aspettavi di vedere?! avrai decine di migliaia di frammenti di dimensioni diverse ed è normale che si veda uno smear... C'è qualcosa che non quadra......