ciao a tutti,volevo sapere se qualcuno mi sa spiegare come si fa a quantificare la quantità da rna mediante northen?so che si utilizza uno standard interno,ma in base a questo come faccio a capire quanto un gene è espresso o spento??
si,ok,ma come faccio a calcolare la precisa quantità di rna,ovvero se io so che ho caricato una concentrazione 10x di rna e una concentrazone 2x di standard facendo il rapporto tra i due viene 5 è questo sarebbe il valore che mi da un indice di quanto di quantè volte è più espresso un rna rispetto allo standerd???
Se sai che nel tuo standard ci sono 5 ng di RNA e l'intensità del tuo campione è 5 volte allora vuol dire che ci saranno 25ng del tuo campione. L'altra cosa che puoi fare è avere una quantificazione relativa (es. il gene X è espresso 3 volte di più del gene Y)