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Claudia_33
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1 Messaggi |
 Inserito il - 30 luglio 2019 : 19:16:57
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Ciao a tutti,
volevo chiedervi un'opinione/consiglio.
Attualmente abbiamo in coltura delle cellule iPS umane che purtroppo presentano una persistente contaminazione.
Questa fortunatamente non compromette totalmente la vitalità cellulare ma provoca parecchia morte e rende le cellule ulteriormente fragili.
Abbiamo provato ad eradicare la contaminazione con Anfotericina e Gentamicina ma non hanno funzionato.
Utilizzando un kit per rilevare le contaminazioni in fluorescenza abbiamo ottenuto qualche foto ma ancora non siamo riusciti a capire con cosa abbiamo a che fare. Quasi certamente si tratta di funghi o spore poichè risultano positivi alla Calceina (Calcofluor).
Qualcuno di voi ci si è mai imbattuto? Allego foto di fluo e bright field.
Grazie in anticipo!
Claudia
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sofychan
Nuovo Arrivato
101 Messaggi |
 Inserito il - 31 luglio 2019 : 09:10:07
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Di contaminazioni da funghi non me ne intendo, ma vi consiglierei (se non l'avete gia fatto), semplicemente di:
- Buttare tutte le colture cellulari che avete nell'incubatore/i
- Spegnerli. Pulire bene bene con sapone/acqua ed etanolo gli incubatori; asciugare e applicare procedure di decontaminazione/pulizia secondo il manuale (magari ci sono procedure di pulizia piu' drastiche in caso di contaminazioni particolare, questa è quella standard periodica che facciamo noi e secondo me va già bene)
- l'ideale sarebbe comprare una nuova vial pulita di cellule, se dubitate che tutto il vostro stock sia tutto contaminato
- e ricordatevi se avete incubatori con l'acqua sotto di usare sempre acqua autoclavata per il refill
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Contaminazione coltura cellulare
