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Discussione

Biso
Nuovo Arrivato

Citt�: Belluno

9 Messaggi

Inserito il - 26 aprile 2007 : 11:13:36

Ciao a tutti! Mi sto accingendo ad iniziare la tecnica dell'immunofluorescenza che non ho mai svolto prima! Tra i numerosi dubbi che mi affiorano mettendo a punto il protocollo

, uno mi preoccupa di pi� perch� ho ricevuto risposte contrastanti: per fissare le cellule � meglio usare la paraformaldeide in polvere o la formaldeide in soluzione al 37%?
Inoltre mi sapreste indicare il metodo migliore per poter maneggiare la PFA in polvere in sicurezza (preparando soluzioni in PBS al 4% per esempio) tenendo conto che la bilancia di precisione, il bagnetto e la piastra magnetica riscaldante non solo li ho fuori cappa chimica, ma in una stanza diversa da quella dove si trova la cappa stessa?

Grazie per il vostro aiuto!

Giuliano652
Moderatore

Prov.: Brescia

6941 Messaggi

Inserito il - 26 aprile 2007 : 11:39:17

per il protocollo non so aiutarti, per la preparazione prova a controllare le frasi di rischio e sicurezza (frasi R e S) che sono sulla confezione della PFA. In tutti i modi credo che una mascherina, guanti e camice siano il minimo.

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chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 26 aprile 2007 : 13:07:02

Noi usiamo PF in granulato che � meglio della polvere, perch� � meno volatile. La soluzione dovrebbe andar bene lo stesso, non credo cambi nulla (forse costa di pi�?).
Per la sicurezza, usa sempre una mascherina quando la pesi, se ce l'hai sotto cappa non ci dovrebbero essere problemi.
Un trucchetto per preparare la soluzione di PF � di usare PBS 3x o 4x o cmq concentrato. Metti la PF nell'acqua con un po' di NaOH cos� si scioglie abbastanza velocemente e poi aggiungi il PBS concentrato.
In questo modo � molto pi� facile scioglierla, perch� se la metti direttamente nel PBS ci mette i secoli...

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Biso
Nuovo Arrivato

Citt�: Belluno

9 Messaggi

Inserito il - 27 aprile 2007 : 10:43:54

Grazie per i consigli e per i suggerimenti!

elly_
Utente Junior

400 Messaggi

Inserito il - 02 maggio 2007 : 09:54:10

Io uso PARAFA 4% in PBS per 10 minuti. Io ce l'ho liquida e da' degli ottimi risultati ciao!