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Messaggio inserito da Gst

sono d'accordo cn qnto dice Giuliano....magari ti può essere utile anche qualke altra info...

La resistenza alla neomicina serve per selezionere le cellule in cui è avvenuta trasfezione.E' un'ulteriore conferma (insieme al geneB9...! Qste cellule le potrai utilizzare, ad esempio, per inserirle in una blastocisti e realizzare un animale transgenico knock-out per il gene A.

Il geneB invece è un gene reporter (altro es di gene reporter è la GFP) che ti serve per verificare in qli cellule si è trasfettato il tuo vettore, se si è trasfettato in una regione espressa del genoma...! La sua peculiarità, cm tutti i geni reporte, è qlla di essere visibile in qlke modo, se espresso! In qsto caso si può verificare la sua inserzione cn un saggio di beta-galattosidasi. La GFP invece è visibile perchè fluorescente se illuminata a una data lunghezza d'onda, invece.

In ogni caso attenzione: la ricombinazione omologa tra il tuo costrutto e il genoma della cell da trasfettare avviene grazie a 2 spalle (2 regioni di DNA che sn alle estremità del tuo cotrutto) omologhe alle regioni di DNA fiancheggianti il geneA.

Fare il knock-out di un gene può servirti per capire qli sn le sue funzioni: ad esmpio, se nn osservi transgenici viventi, vuol dire che è vitale! Se i transgenici hanno pelo molto lungo (esempio di fantasia eh!) vuol dire che il geneA è coinvolto in pathway che determina fenotipo wt del pelo!

Spero di essere stata chiara

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