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atreliu
Amministratore
Prov.: Milano
Città: Milano
2484 Messaggi |
Inserito il - 08 settembre 2003 : 00:47:37
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Salve,
La ringrazio per la fiducia datami, e per la ottima valutazione del sito.
Spero che abbia trovato ciò che cercava, nei modi e con velocità adeguata.
Per analizzare i campioni, e avere un cDNA da poterlo poi utilizzare, basta,
un semplice polyT, che si appai quindi alle code polyA dei mRNA. L'OH libero
fornirà l'innesco per la reazione di retro-trascrizione.
Consiglierei quindi, una estrazione di RNA messaggero con colonna per
affinità con resina-polyT, oppure una prima estrazione di RNA totale, con
semplice trattamento di DNasi (attenzione ad usare guanti per non inquinare
i campioni con RNasi nonrmalmente presente su mani e ambiente), uso di
primer polyT e DNApolimerasi RNA dipendente. Una DNasiH, o semplicemente una
RNasi, farebbe ottenere il cDNA pulito e pronto per l'uso.
Spero di esserLe stato di aiuto, nel caso in cui non fosse così, o nel caso
in cui avesse trovato inesattezze o incompletezze nel sito, mi riscriva
senza problemi.
Cordiali saluti,
Riccardo
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